硅胶基质聚天冬氨酸固定相的合成及对多肽的分离

Preparation of a silica-based stationary phase with polyaspartates and its separation behaviors for peptides

  • 摘要: 硅胶基质聚天冬氨酸固定相是一类典型的弱阳离子交换色谱填料,对多肽、蛋白质等生物大分子表现良好的分离性能,受到研究者的极大关注。本文分别将不同分子量的聚琥珀酰亚胺(PSI)化学键合到氨丙基硅胶表面得到四种键合聚天冬氨酸的固定相材料(即YCSiP-I、-II、-III和-IV),采用红外光谱、热重分析和zeta电位测定等方法进行表征,研究硅胶孔径、PSI的分子量、流动相pH值和离子强度等因素对分离多肽的影响。结果表明,红外光谱中3072、1720和1030 cm-1等处吸收峰分别对应为?N-H、?C=O和?Si-O-Si的伸缩振动峰,说明聚琥珀酰亚胺结合到硅胶上;YCSiP分离多肽主要受底物与固定相间的静电作用影响;由小孔径的硅胶和低分子量的聚琥珀酰亚胺制备得到的固定相YCSiP对多肽表现更好的分离性能;随着流动相的离子强度增大,多肽在柱上的保留均显著减弱,在离子强度为50 mM的流动相中,6种多肽在固定相上的分离效果最好。本研究丰富了硅胶基质聚天冬氨酸固定相材料在多肽分离中的应用。

     

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